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校准曲线的定义、绘制与检验

点击次数:2686 发布时间:2012-09-27

  校准曲线包括标准曲线和工作曲线,前者用标准溶液系列直接测量,没有经过水样的预处理过程,这对于废水样品或丛体复杂的水样往往造成较大误差;而后者所使用的标准溶液经过了与水样相同的消解、净化、测员等全过程。
  凡应用校准曲线的分析方法,都是在样品测得信号值后,从校准曲线上查得其含量(或浓度)。因此,绘制准确的校准曲线,直接影响到样品分析结果的准确与否。此外,校准曲线也确定了方法的测定范围。

1、校准曲线的绘制

  ①对标准系列,溶液以纯溶剂为参比进行测量后,应先作空白校正,然后绘制标准曲线;
  ②标准溶液一般可直接测定,但如试样的预处理较复杂致使污染或损失不可忽略时,应和试样同样处理后再测定,在废水测定或有机污染物测定中十分重要,此时应做工作曲线。
  ③校准曲线的斜率常随环境温度、试剂批号和贮存时间等实验条件的改变而变动。因此,在测定试样的同时,绘制校准曲线zui为理想,否则应在测定试样的同时,平行测定零浓度和中等浓度标准溶液各两份,取均值相减后与原校准曲线上的相应点核对,其相对差值根据方法精密度不得大于5%-10%,否则应重新绘制校准曲线。

2、校准曲线的检验

  ①线性检验:即检验校准曲线的稍密度。对于以4-6个浓度单位所获得的测量信号值绘制的校准曲线,分光光度法一般要求其相关系数|γ|≥0.9990,否则应找出原因并加以纠正,重新绘制合格的校准曲线。
  ②截距检验:即检验校准曲线的准确度,在线性检验合格的基础上,对其进行线性回归,得出回归方程y=a+bx,然后将所得截距a与0作t检验,当取95%置信水平,经检验无显著性差异时,a可作0处理,方程简化为y=bx,移项得x=y/b。在线性范围内,可代替查阅校准曲线,直接将样品测量信号值经空白校正后,计算出试样浓度。
  当a与0有显著性差异时,表示校准曲线的回归方程计算结果准确度不高,应找出原因并予以校正后,重新绘制校准曲线并经线性检验合格,再计算回归方程,经截距检验合格后投入使用。
  回归方程如不经上述检验和处理,就直接投入使用,必将给测定结果引入差值相当于截距a的系统误差。
  ③斜率检验:即检验分析方法的灵敏度,方法灵敏度是随实验条件的变化而改变的。在完全相同的分析条件下,仅由于操作中的随机误差所导致的斜率变化不应超出一定的允许范围,此范围因分析方法的精度不同而异。例如,一般而言,分子吸收分光光度法要求其相对差值小于5%,而原子吸收分光光度法则要求其相对差值小于10%等等。文章由华晨仪器整理。

 

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